I. INTRODUCTION
L’hémogramme, ou Numération Formule Sanguine (NFS), est un examen biologique fondamental permettant l’étude quantitative et qualitative des éléments figurés du sang : hématies, leucocytes et plaquettes.
Il constitue un outil de première intention pour le diagnostic, l’orientation étiologique et le suivi de nombreuses pathologies hématologiques et non hématologiques.
II. DONNÉES QUANTITATIVES
1. Prélèvements
- Sang veineux
- Tube sous vide avec anticoagulant EDTA
- L’EDTA chélate le Ca²⁺ → excellente conservation cellulaire
- Sang capillaire
- Bout du doigt (adulte)
- Talon (nouveau-né)
2. Paramètres mesurés par les automates
| Paramètre | Principe de mesure |
|---|---|
| Numération des hématies | Impédance / optique |
| Dosage de l’hémoglobine | Spectrophotométrie / turbidimétrie |
| VGM | Impédance |
| Réticulocytes | Fluorescence |
| Érythroblastes | Fluorescence + diffraction |
| Leucocytes | Diffraction lumineuse + fluorescence |
| Différentielle leucocytaire | Diffraction + fluorescence / impédance |
| Plaquettes et indices plaquettaires | Impédance + optique / fluorescence |
| Courbe de Price-Jones | Distribution volumétrique des GR |
| Hématocrite manuel | Centrifugation capillaire |
Expressions des résultats
- Numérations (GR, GB, PLT) : /mm³ (µL) ou /L
- Hémoglobine : g/dL ou g/L
3. Paramètres calculés
| Paramètre | Formule |
|---|---|
| Hématocrite (%) | (GR × VGM) / 10 |
| TCMH (pg) | (Hb / GR) × 10 |
| CCMH (%) | (Hb / Hte) × 100 |
| RDW-CV (%) | (Écart-type du VGM / VGM) × 100 |
NB : TCMH et CCMH peuvent être mesurées directement par certains automates.
4. Valeurs de référence (adulte)
| Paramètre | Homme | Femme |
|---|---|---|
| Érythrocytes (10⁶/µL) | 4,5 – 5,8 | 4,0 – 5,2 |
| Hématocrite (%) | 40 – 53 | 37 – 47 |
| Hémoglobine (g/dL) | 13 – 17 | 12 – 16 |
| VGM (fL) | 80 – 100 | 79 – 99 |
| TCMH (pg) | 27 – 32 | 27 – 32 |
| CCMH (g/dL) | 32 – 36 | 32 – 36 |
| RDW (%) | 11 – 14,5 | 11 – 14,5 |
| Leucocytes (G/L) | 4 – 10 | 4 – 10 |
| PNN (G/L) | 1,5 – 7 | 1,5 – 7 |
| Lymphocytes (G/L) | 1 – 4 | 1 – 4 |
| Monocytes (G/L) | 0,2 – 1 | 0,2 – 1 |
| PNE (G/L) | 0,1 – 0,4 | 0,1 – 0,4 |
| PNB (G/L) | 0 – 0,1 | 0 – 0,1 |
| Plaquettes (G/L) | 150 – 400 | 150 – 400 |
III. DONNÉES QUALITATIVES
1. Frottis sanguin coloré au MGG
Colorants
- May-Grünwald : éosine + bleu de méthylène dans le méthanol
- Giemsa : éosine + azurs de méthylène
- Eau tamponnée pH 7–7,2 → ionisation des colorants
Principes tinctoriaux
- Éosine (acide) → structures basiques : rose-orangé
Ex : cytoplasme des GR, granulations des PNE - Bleu/azurs (basiques) → structures acides : bleu à pourpre
Ex : noyaux riches en ADN, cytoplasmes riches en ARN - Éléments neutrophiles → coloration violacée
Résultat
- Étude morphologique des GR, GB et PLT
Variante
- MCDH : coloration proche du MGG sans méthanol (éthanol)
2. Frottis au bleu de crésyl
- Met en évidence l’ARN résiduel des réticulocytes
IV. INTERPRÉTATION DE L’HÉMOGRAMME
1. Lignée érythrocytaire
- Anémie définie par l’Hb
- Homme : < 13 g/dL
- Femme menstruée : < 11,5 g/dL
- Femme enceinte : < 11 g/dL
- VGM
- Microcytose : < 80 fL
- Normocytose : 80 – 98 fL
- Macrocytose : > 100 fL
- Chromie
- Hypochromie : TCMH < 27 pg et CCMH < 32 %
- Normochromie : TCMH 27–32 pg et CCMH 32–36 %
- Sensibilité des paramètres
- Anémie microcytaire : TCMH le plus sensible
- Anémie macrocytaire : CCMH le plus sensible
- Anémie normocytaire : TCMH et CCMH
- RDW
- 15 % : anisocytose
- Réticulocytes
- > 120 G/L : anémie régénérative
- 25–80 G/L : anémie arégénérative
2. Leucocytes
- Leucocytose : > 10 G/L
- Leucopénie : < 4 G/L
- PNN :
- > 8 G/L : polynucléose neutrophile
- 0,5 – 1,5 G/L : neutropénie
- < 0,5 G/L : agranulocytose
- PNE : > 0,7 G/L → hyperéosinophilie
- Lymphocytes :
- < 1 G/L : lymphopénie
- > 4 G/L : hyperlymphocytose
- Monocytes : > 1 G/L → monocytose
3. Plaquettes
- Thrombocytose : > 450 G/L
- Thrombopénie : < 150 G/L
4. Variations physiologiques
- Exercice physique : augmentation transitoire des GB (démargination des PNN)
- Altitude (> 3000 m) : polyglobulie
- Ethnie afro-descendante : neutropénie modérée physiologique
- Grossesse : hémodilution, hyperleucocytose à PNN, légère thrombopénie
- Tabagisme : augmentation des PNN
V. ERREURS POSSIBLES DE L’HÉMOGRAMME
1. Paramètres érythrocytaires
a. Mesure du VGM
- Fausse augmentation
- Agglutinines froides ou chaudes
- Hyperleucocytoses importantes
- Hyperglycémie majeure
- Prélèvement proche d’un soluté glucosé
- Hypernatrémie sévère
- Sang vieilli (> 3 jours)
- Fausse diminution
- Hyponatrémie sévère
b. Mesure de la CCMH
- Fausse augmentation
- Agglutinines
- Hyperlipidémie
- Hyperleucocytose
- Paraprotéinémie, cryoglobulinémie
- Hyperbilirubinémie
- Hémolyse in vitro
- Sphérocytose marquée
- Fausse diminution
- Hyperglycémie
- Hypernatrémie
- Sang vieilli (> 3 jours)
2. Paramètres leucocytaires
- Interférences possibles en cas de :
- Cellules anormales
- Fragments cellulaires
- Cryoglobulines
- Mauvaise conservation de l’échantillon
3. Paramètres plaquettaires
- Fausses thrombopénies :
- Agrégats plaquettaires
- Satellitisme plaquettaire
- Thrombopénie induite par l’EDTA
- Confirmation indispensable par frottis sanguin